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表達(dá)文庫(kù)（表達(dá)文庫(kù)）

次瀏覽 | 更新時(shí)間：2023-05-22

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表達(dá)文庫(kù)

表達(dá)文庫(kù)：如果所進(jìn)行的克隆實(shí)驗(yàn)是為了大量表達(dá)目的蛋白，則必須用表達(dá)載體來構(gòu)建能夠產(chǎn)生足夠的基因編碼蛋白的表達(dá)文庫(kù)。表達(dá)載體中除有克隆載體的元件外，還具有控制基因表達(dá)的序列(如啟動(dòng)子、SD 序列、ATG.終止子等)。

基本介紹

表達(dá)載體又有融合蛋白表達(dá)載體及天然蛋白表達(dá)載體之分。表達(dá)文庫(kù)適合不知道蛋白質(zhì)的氨基酸序列、不能用核酸類探針篩具有表達(dá)載體選目的基因的分離。蛋白質(zhì)表達(dá)文庫(kù)一般是CDNA 群體融合于噬菌體或質(zhì)粒的開放讀框而形成的文庫(kù)。載體被基因工程細(xì)菌表達(dá)的DNA 為RNA 和蛋白質(zhì)。其結(jié)果形成的噬菌體斑或細(xì)菌集落能用蛋白質(zhì)或核酸探針來篩選，以鑒定編碼特異結(jié)合蛋白質(zhì)的CDNA。Xencor公司開發(fā)了ProCode 文庫(kù)，這是一個(gè)蛋白表達(dá)文庫(kù)，它可以來自于任何感興趣的細(xì)胞或者組織，文庫(kù)中的每個(gè)蛋白在翻譯后都帶有一個(gè)質(zhì)粒標(biāo)記，即一個(gè)含有該蛋白相應(yīng)CDNA的小環(huán)狀DNA。這個(gè)文庫(kù)可以在合適的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)，并且可以保持正確的蛋白折疊和加工。檢測(cè)表達(dá)的蛋白與候選的藥物之間的相互作用時(shí)，由于CDNA 標(biāo)記的存在，呈陽(yáng)性反應(yīng)的蛋白很容易鑒別出來。

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