環(huán)境因素、操作因素、實(shí)驗(yàn)方法或者患者自身因素等都可能造成假陽性檢測(cè)結(jié)果。以梅毒檢測(cè)為例，分析造成假陽性的普遍原因：
梅毒的診斷主要靠臨床癥狀和血清檢查，常見的是梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA)和梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，PA已經(jīng)確定為美國(guó)疾控中心的標(biāo)準(zhǔn)方法。ELISA因其操作方便，結(jié)果較為準(zhǔn)確，價(jià)格低廉在國(guó)內(nèi)還受到廣泛的使用。梅毒的診斷主要靠臨床癥狀和血清檢查，無臨床癥狀和疾病接觸史可出現(xiàn)假陽性，其主要原因有以下幾點(diǎn)： 1.標(biāo)本因素
1.1標(biāo)本處理不完全：血液標(biāo)本未完全抗凝即開始離心，析出的纖維蛋白易在孔板中形成白色薄膜或者絮狀物，若清洗不干凈，殘余在孔板中極易使吸光度值偏高，造成假陽性。
1.2標(biāo)本溶血：血液樣本溶血后細(xì)胞內(nèi)的各種酶和具有酶樣活性的物質(zhì)可與底物非特異性結(jié)合，標(biāo)本溶血時(shí)細(xì)胞內(nèi)液的各種活性酶及具有酶樣活性的物質(zhì)可與底物非特異性結(jié)合；溶血后釋放出的血紅蛋白(Hb)具有類過氧化物酶的活性，可少量吸附于孔板上，隨著溶血程度增大而增加，在洗板不徹底的情況下從而使樣本OD值升高，造成假陽性。 1.3標(biāo)本被細(xì)菌污染：標(biāo)本采集后及分離血清時(shí)若被細(xì)菌污染，也可引起內(nèi)源性辣根過氧化物酶增多，相應(yīng)的酶標(biāo)記方法會(huì)產(chǎn)生非特異性干擾，造成假陽性。
1.4標(biāo)本保存不當(dāng)：血液標(biāo)本保存過久易滋生細(xì)菌，影響檢測(cè)結(jié)果。時(shí)間過長(zhǎng)的標(biāo)本，血清標(biāo)本IgG聚集成多聚體，AFP形成二聚體，造成假陽性。 2.使用儀器及操作因素
2.1拖帶現(xiàn)象：全自動(dòng)家養(yǎng)系統(tǒng)可以準(zhǔn)確、快速加樣，避免手工的誤差也保證了加樣的一致性。但是全自動(dòng)加樣儀還不能完全確保一份樣本一個(gè)加樣頭。加完樣后雖然其可以自動(dòng)清洗3次，而高濃度的抗原或者抗體標(biāo)本檢測(cè)后，拖帶污染可能導(dǎo)致后面或者多孔樣本的假陽性。
2.2酶標(biāo)儀：酶標(biāo)儀進(jìn)行比色時(shí)，當(dāng)反應(yīng)板有氣泡或者污 染時(shí)，容易出現(xiàn)吸光度值升高，從而造成假陽性結(jié)果。
2.3試驗(yàn)溫度：試驗(yàn)溫度過高或過低都有可能引起血清蛋白異常，造成假陽性。最好在室溫18～25℃進(jìn)行操作。
2.4操作因素：操作過程中一些因素也會(huì)導(dǎo)致假陽性，檢測(cè)底物反復(fù)使用出現(xiàn)被污染或者底物受到陽光照射時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)出現(xiàn)假陽性；孔板洗滌過程中出現(xiàn)溢出現(xiàn)象，陽性標(biāo)本的反應(yīng)液污染臨近孔板造成假陽性；洗滌過程中洗滌時(shí)間太短或次數(shù)太少，洗滌不充分導(dǎo)致酶制劑殘留形成假陽性。
3.個(gè)人因素
3.1生理機(jī)能:ELISA試劑盒主要是通過抗原抗體檢測(cè)梅毒螺旋體，理論上ELISA的位點(diǎn)少，結(jié)果更具特異性，但由于人血清抗原中存在假陽性位點(diǎn)的問題，造成假陽性。老年人身體機(jī)能退化，易出現(xiàn)免疫功能異常，產(chǎn)生乙烯異常蛋白干擾檢測(cè)結(jié)果。
3.2疾?。豪夏耆碎L(zhǎng)伴有各種疾病，如腸癌、肺癌、腹腔內(nèi)膜癌、子宮內(nèi)膜癌等腫瘤，肺結(jié)核，血液病，自身免疫性疾病，可以導(dǎo)致患者自身免疫環(huán)境的改變，或者糖尿病、腫瘤、肝病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者體內(nèi)含有治療性抗體、糖尿病抗體、類風(fēng)濕因子、甲胎蛋白等，使底物出現(xiàn)顯色反應(yīng)，造成假陽性結(jié)果。 4.方法學(xué)因素
4.1灰?guī)^(qū)現(xiàn)象
ELISA是一種定性檢測(cè)梅毒的方法，在陽性與陰性之間有一條分界線，即判定值，通常在判定值左右有一定的范圍，為灰?guī)^(qū)。結(jié)果位于灰?guī)^(qū)的標(biāo)本易出現(xiàn)假陽性，需要重新檢測(cè)確定是否為陽性。
4.2空白對(duì)照的影響
空白對(duì)照組對(duì)結(jié)果具有很大的影響，比如反應(yīng)孔出現(xiàn)刮痕，可使測(cè)定值升高，不設(shè)定對(duì)照組也可出現(xiàn)誤讀形成假陽性。 
